小鼠elisa kit的處理方法有哪些呢？今天我們來詳細(xì)講解一下！
純化的小鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入C-反應(yīng)蛋白(CRP)，再與HRP標(biāo)記的C-反應(yīng)蛋白(CRP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C-反應(yīng)蛋白(CRP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)的含量。
elisa屬于固相免疫分析，抗原和抗體的結(jié)合只發(fā)生在固相表面。以抗體包被的三明治法為例，添加到板孔中的抗原不具有固相抗結(jié)合的平等機(jī)會。只有靠近孔壁的一層溶液中的抗原與抗體直接接觸。這是一個逐漸平衡的過程，因此需要擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。隨后添加到固相抗原的酶標(biāo)記抗體的結(jié)合也是如此。
不管你對實驗在懂，了解相關(guān)注意事項那是很有必要的，這不僅可以培養(yǎng)我們養(yǎng)成好的實驗習(xí)慣，還可以減少問題的。下面給大家講述一下小鼠elisa kit使用注意事項。
1、嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育。所有試劑都須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6、在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8、包括小鼠elisa kit在內(nèi)的任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
更新時間：2021-10-26 
瀏覽次數(shù)：894
我的位置：