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更新時(shí)間:2022-04-07
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一、關(guān)于植物凝膠:
植物凝膠由假單胞菌分泌而來,是葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等的混合物,其形成的凝膠具有無色、透亮和高韌性的特點(diǎn);其克服了傳統(tǒng)瓊脂在植物組織培養(yǎng)中的固有缺陷,是配制植物組織培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基的bu二選擇。
植物凝膠的成膠需要二價(jià)陽離子的存在,且對(duì)pH敏感。一般植物培養(yǎng)基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓植物凝膠凝固,鈣鎂離子減少應(yīng)適當(dāng)增加植物凝膠的用量;植物培養(yǎng)基一般調(diào)pH至5.8,pH低于5.5會(huì)嚴(yán)重影響植物凝膠凝固。微生物學(xué)研究所用的低鹽培養(yǎng)基,通常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或提高植物凝膠的加入濃度。植物凝膠常用工作濃度:MS培養(yǎng)基為例2.5-4 g/L;1/2MS培養(yǎng)基3-5 g/L。微生物培養(yǎng)基10 g/L。
二、關(guān)于瓊脂:
瓊脂,學(xué)名瓊膠,英文名(agar),又名洋菜(agar-agar)、海東菜、凍粉、瓊膠、石花膠、燕菜精、洋粉、寒天、大菜絲,是植物膠的一種,常用海產(chǎn)的麒麟菜、石花菜、江蘺等制成,為無色、無固定形狀的固體,亦常用作細(xì)菌培養(yǎng)基。為什么叫瓊脂,主要是用海南的麒麟菜或石花菜制作出來的。海南的簡(jiǎn)稱就是瓊。
瓊脂的最有用特性是它的凝點(diǎn)和熔點(diǎn)之間的溫度相差很大。它在水中需加熱至95℃時(shí)才開始熔化,熔化后的溶液溫度需降到40℃時(shí)才開始凝固,所以它是配制固體培養(yǎng)基的不錯(cuò)的凝固劑。用瓊脂配制的固體培養(yǎng)基,可用以進(jìn)行高溫培養(yǎng)而不熔化,在凝固之前接種時(shí),也不致將培養(yǎng)物燙死。因此,瓊脂是制備各種生物培養(yǎng)基中應(yīng)用*泛的一種凝固劑。植物組培培養(yǎng)基中常用濃度在0.7%左右(視瓊脂強(qiáng)度而定),而微生物培養(yǎng)基通常1.5%左右,對(duì)于偏酸性(pH小于6)的微生物培養(yǎng)基一般用到2%左右。
三、植物凝膠與瓊脂的區(qū)別:
1、植物凝膠和瓊脂都對(duì)酸性條件敏感,培養(yǎng)基pH不宜低于5.5,應(yīng)適當(dāng)添加使用量,pH值過低則*不凝結(jié)。
2、植物凝膠對(duì)鈣、鎂等二價(jià)陽離子有濃度要求,瓊脂則沒有,植物培養(yǎng)基鈣、鎂離子不足應(yīng)適當(dāng)增加植物凝膠使用量。
3、植物凝膠保質(zhì)期短,產(chǎn)品使用后應(yīng)避光防潮保存。要求開封后一年內(nèi)用完。瓊脂可長(zhǎng)期儲(chǔ)存,對(duì)環(huán)境要求不高。
4、植物凝膠用量小,但價(jià)格貴。
5、植物凝膠成膠后透明度好,瓊脂凝膠透明度差
四、植物組培培養(yǎng)基的配制方法:
1、按要求溶解培養(yǎng)基基礎(chǔ)鹽和糖類,調(diào)pH至5.8;
2、加入適量植物凝膠或瓊脂,121℃,滅菌15-20分鐘;
3、冷卻至50-60℃,按實(shí)驗(yàn)要求加入植物激素或抗生素,混勻;
4、倒入培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)管,冷卻,凝固后接入外植體。