酶elisa試劑盒在選購(gòu)時(shí)須考慮血漿樣本中抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容;此外,在某些情況下,樣品中會(huì)存在干擾因素,如溶血血漿、高脂肪含量樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的胎牛血清等。
因此,應(yīng)根據(jù)樣品選擇試劑盒,必要時(shí)應(yīng)根據(jù)樣品適當(dāng)優(yōu)化試劑盒?;蜷喿x一些可靠的供應(yīng)商工具包的說(shuō)明,或在采集樣品前直接咨詢供應(yīng)商。如果您的樣本是組織或細(xì)胞裂解物,您需要更仔細(xì)地選擇試劑盒。
市場(chǎng)上的大多數(shù)商業(yè)試劑盒尚未通過(guò)來(lái)自多個(gè)來(lái)源的組織樣本進(jìn)行驗(yàn)證。這需要您理解,不是所有試劑盒中使用的抗體對(duì)都能從一堆裂解蛋白中特異性地檢測(cè)您的目標(biāo)蛋白,并且還考慮組織樣本的基質(zhì)效應(yīng)。
酶elisa試劑盒使用時(shí)怎么操作手動(dòng)洗板呢?
1、當(dāng)洗滌緩沖液中有晶體沉淀時(shí),可將試劑瓶置于50°C水浴或培養(yǎng)箱中,在制備前將晶體*溶解。
2、快速加入洗滌液。洗瓶時(shí)無(wú)需使用多通道移液管。洗液應(yīng)新鮮制備,以避免被其他試劑或細(xì)菌污染。
3、通常清洗盤子3~4次。加入洗滌液后,輕輕搖動(dòng)微孔板。扔掉盤子,快速簡(jiǎn)單地倒入液體。澆注后,在吸水紙上輕拍干燥,并選擇無(wú)灰塵和碎屑的優(yōu)良的吸水紙。用力拍打木板,使孔中的墻壁上沒(méi)有可見的液體。
4、不要讓樣品干燥太久。后續(xù)液體添加應(yīng)在酶標(biāo)板干燥后立即進(jìn)行。
拍手吸水紙可選用廚房用紙,吸水性好,無(wú)雜物。為保證微孔洗滌液的浸泡時(shí)間相同,可采用前后、前后交替添加洗滌液的方法。
酶elisa試劑盒做預(yù)實(shí)驗(yàn)的必要性:
1、通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn),熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,發(fā)現(xiàn)可以忽略的問(wèn)題;
2、可檢測(cè)樣品與試劑盒是否匹配。如果不匹配,則不會(huì)浪費(fèi)太多樣本;
3、可粗略參考樣品中目標(biāo)分析物的濃度,以確定適當(dāng)?shù)南♂尪取?/div>