培養(yǎng)基采用化學(xué)成分未知或不全知的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制而成。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有馬鈴薯、小麥、大豆粉、高粱粉、薯類、胡蘿卜、米糠、麩皮、各種秸稈、木屑、甘蔗渣、棉籽殼、豆腐渣、酒糟、禽畜糞等。其營(yíng)養(yǎng)齊全,取材容易,價(jià)格低廉,配制方便,是培養(yǎng)菌種和栽培生產(chǎn)理想的產(chǎn)品。配制時(shí)宜采用新鮮的材料,秸稈要切短,殼粒需粉碎。
影響滅菌的因素很多,除了雜菌的種類和數(shù)量、滅菌溫度和時(shí)間長(zhǎng)度外,還取決于:
1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的維持
當(dāng)微生物在濕熱滅菌中被殺死時(shí),營(yíng)養(yǎng)成分也受到一定程度的破壞,尤其是氨基酸和維生素。比如在121℃下僅20分鐘,59%的賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸被破壞,還有相當(dāng)數(shù)量的蛋氨酸和色氨酸也被破壞。在熱量的作用下,一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可能會(huì)因熱量而相互反應(yīng),導(dǎo)致原有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生變化,從而影響質(zhì)量。
2.微生物的耐熱性
細(xì)菌孢子熱阻大,滅菌所需時(shí)間取決于將細(xì)菌孢子減少到規(guī)定數(shù)量所需的時(shí)間。
3.pH值
pH值對(duì)微生物的耐熱性影響很大。當(dāng)pH值在6.0-8.0之間時(shí),微生物死亡的可能性小。酸堿度越低,所需的時(shí)間越短。
4.顆粒
小顆粒容易殺菌,大顆粒難殺菌。含有少量較大顆粒和粗纖維的介質(zhì)可以通過(guò)粗過(guò)濾去除(這不應(yīng)影響介質(zhì)的質(zhì)量)。結(jié)塊會(huì)導(dǎo)致滅菌不*。
5.泡沫
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進(jìn)去,殺死雜菌。
現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)基通常包含70至100種成分,數(shù)百種成分的選擇以及每種成分都可以從多種渠道來(lái)源獲得。這導(dǎo)致了錯(cuò)綜復(fù)雜的供應(yīng)商網(wǎng)絡(luò)和可能的變異性??紤]到這種復(fù)雜性,我們還需要從不同角度對(duì)培養(yǎng)基生產(chǎn)穩(wěn)定性進(jìn)行控制,并完善供應(yīng)管理網(wǎng)絡(luò)。