Sigma:間質(zhì)膠原酶IV,C1889-50MG,CAS: 9001-12-1

屬性：

質(zhì)量水平：200

無菌性：sterile-filtered

形式：powder

specific activity：≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量：68-130 kDa

適用性：release of physiologically active rat hepatocytes tested

特色行業(yè)：Diagnostic Assay Manufacturing

儲(chǔ)存溫度：?20°C

一般描述：

溶組織梭菌含有兩種膠原酶，可剪切膠原酶三螺旋不同的切割位點(diǎn)。切割效率比哺乳動(dòng)物膠原酶更高。梭菌膠原酶與氣性壞疽的細(xì)菌侵襲有關(guān)。

應(yīng)用：

膠原酶已被用于制備動(dòng)脈組織，用于研究晚期糖基化終產(chǎn)物（AGE）。該酶還與其他蛋白酶一起用于人腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮和許多其他組織的解聚。它在肝臟和腎臟灌注研究，胰腺消化和非實(shí)質(zhì)肝細(xì)胞的分離中也是有效的。當(dāng)測(cè)試該酶是否適合釋放肝細(xì)胞時(shí)。對(duì)于每只大鼠肝臟，膠原酶以約 1mg/mL 使用，總體積為 100mL。

膠原酶（源于溶組織梭菌）用于解離組織樣本，如脾臟和睪丸組織。

生化/生理作用：

從組織中有效釋放細(xì)胞需要膠原酶和中性蛋白酶的作用。膠原酶被每克摩爾酶 4 克原子鈣（Ca2+）活化。培養(yǎng)濾液被認(rèn)為含有至少 7 種不同的蛋白酶，分子量范圍為 68-130 kDa（最適 pH 值：6.3-8.8）。該酶通常用于消化組織樣品中的結(jié)締組分以釋放單個(gè)細(xì)胞。膠原酶治療可導(dǎo)致一些細(xì)胞死亡。通常，用于消化的濃度為 0.1 至 5mg/mL。反應(yīng)持續(xù)時(shí)間從 15 分鐘到幾小時(shí)不等，這使得能夠有效地解離細(xì)胞而不會(huì)導(dǎo)致過多的細(xì)胞死亡。具有鈣和 BSA 的 Krebs Ringer 緩沖液是優(yōu)選的，并且 Zn2+ 是其活性所必需的。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

注意：

根據(jù)提供，該產(chǎn)品在 -20°C 下，可穩(wěn)定保存一年。在 37℃、50℃ 和 -20℃ 下，30 天內(nèi) FALGPA 或蛋白酶活性沒有損失。如果以等分試樣（10mg/mL）快速冷凍，并且在 -20℃ 下冷凍，則粗膠原酶的溶液是穩(wěn)定的。進(jìn)一步的凍融循環(huán)會(huì)損壞溶液。 當(dāng)在冰上保持時(shí)，該產(chǎn)品在 7 小時(shí)內(nèi)保持 100％ 活性。

單位定義：

一個(gè)膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸，5小時(shí)，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個(gè) FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個(gè)中性蛋白酶單元水解酪蛋白，產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時(shí)，pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個(gè)梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

制備說明：

從 IV 型（C5138）制備。可以通過在 37℃ 下，將 0.05-0.1mg/mL 膠原酶溶解在含有 0.36mM 氯化鈣（TESCA）（pH 7.4）的 50mM TES 緩沖液中來制備儲(chǔ)備溶液。該產(chǎn)品還含有梭菌蛋白酶，非特異性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。

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